液相色譜也會(huì)“撞鬼”？

　　時(shí)光飛逝，轉(zhuǎn)眼之間2020年只剩下了后兩個(gè)月。今年的萬圣節(jié)剛剛過去，每到萬圣節(jié)，孩子們會(huì)裝扮成鬼怪的樣子索要糖果，所以人們走在街上時(shí)不時(shí)會(huì)“撞鬼”。不僅是大人們會(huì)“撞鬼”，液相色譜也會(huì)“撞鬼”。

　　鬼峰是液相色譜中常出現(xiàn)的問題之一，導(dǎo)致鬼峰出現(xiàn)的因素有很多，在使用液相色譜儀時(shí)任何不當(dāng)?shù)牟僮鞫伎赡軙?huì)產(chǎn)生鬼峰，從而影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。根據(jù)鬼峰出現(xiàn)的頻率判斷，產(chǎn)生鬼峰的主要因素有溶劑問題，儀器問題、流動(dòng)相殘留氣泡以及操作不當(dāng)?shù)取?br /> 

 

一、溶劑問題
 

　　1.有機(jī)溶劑

　　甲醇制備工藝相較乙腈的制備工藝來說較為簡(jiǎn)單，其雜質(zhì)含量也較少。但甲醇紫外吸收范圍比乙腈廣，當(dāng)使用紫外檢測(cè)器尤其波長(zhǎng)較低時(shí)，用甲醇做有機(jī)相會(huì)導(dǎo)致漂移太大產(chǎn)生問題。而用作梯度色譜的乙腈質(zhì)量要求較高，采用進(jìn)口梯度色譜乙腈能夠很好的減少鬼峰的出現(xiàn)。而且如果有機(jī)相使用完后未更換新的流動(dòng)相瓶，直接添加補(bǔ)充到舊的流動(dòng)相瓶也有可能會(huì)產(chǎn)出鬼峰。

　　2.水

　　要保證水的“干凈”，避免水中含有較多的雜質(zhì)，盡量用HPLC級(jí)的純水并且水相要現(xiàn)配現(xiàn)用，避免微生物滋長(zhǎng)。

　　3.其它試劑

　　緩沖鹽、TFA、EDTA等試劑也會(huì)對(duì)流動(dòng)相造成很大的影響，盡量用純度高的試劑配制流動(dòng)相。

　　二、儀器問題

　　1.液相的流動(dòng)相管路被污染

　　長(zhǎng)時(shí)間使用含水量較高的流動(dòng)相(尤其是加入了緩沖鹽)，細(xì)菌很容易在管路中滋生，細(xì)菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物或是細(xì)胞碎片會(huì)造成鬼峰出現(xiàn)。

　　2.檢測(cè)器樣品殘留

　　一些樣品組分在檢測(cè)器流通池內(nèi)殘留，從而產(chǎn)生鬼峰的情況，這種情形，需要對(duì)流通池進(jìn)行*清洗。

　　3.單向閥堵塞

　　由于單向閥堵塞而造成系統(tǒng)壓力不穩(wěn)，從而產(chǎn)生鬼峰。

　　4.色譜柱中組分殘留

　　色譜柱可對(duì)流動(dòng)相或系統(tǒng)流路內(nèi)的強(qiáng)保留污染組分起到富集作用，在有機(jī)相比例隨梯度程序變化的過程中而被沖洗出來，污染組分殘留會(huì)導(dǎo)致鬼峰的出現(xiàn)。
 

 

三、流動(dòng)相殘留氣泡
 

　　這種情況下可將流動(dòng)相超聲或鼓He脫除氣泡并打開purge閥，大流速?zèng)_出儀器管路中的氣泡，來減少氣泡引起的鬼峰現(xiàn)象。

　　四、操作問題

　　1.流動(dòng)相配置過程中受到污染

　　主要是盛放流動(dòng)相的容器或是樣品瓶受到污染。這種污染可能來自于洗滌劑、鉻酸洗液或是其他實(shí)驗(yàn)人員用完后的殘留雜質(zhì)。有時(shí)流動(dòng)相容器的塑料蓋碎片都有可能是雜質(zhì)的來源。對(duì)于樣品瓶污染情況下的鬼峰，容易排除，僅需要分別將樣品溶解或稀釋用的試劑以及進(jìn)樣小瓶更換，即可確定鬼峰的來源。

　　2.樣品稀釋液與流動(dòng)相極性或者pH相差太大

　　這也是導(dǎo)致鬼峰的原因之一，這種問題很有可能導(dǎo)致樣品分為兩個(gè)不同的階段出峰，從而產(chǎn)生雙峰或者多峰。

　　討論到這里，大家可以看到鬼峰的來源多種多樣的，除了避免實(shí)驗(yàn)操作錯(cuò)誤、溶劑和儀器錯(cuò)誤導(dǎo)致鬼峰出現(xiàn)，使用鬼峰捕集柱能大大減少鬼峰的出現(xiàn)。恒譜生鬼峰捕集去除柱也稱鬼峰小柱，將鬼峰捕集柱安裝在梯度混合器和自動(dòng)進(jìn)樣器之間，不僅能夠去除流動(dòng)相中的雜質(zhì)，還可以有效捕集管路和混合器中的雜質(zhì)。柱芯容積約700μL，耐壓>35Mpa，有多種尺寸、規(guī)格可供選擇。
 

 

　　恒譜生科學(xué)儀器有限公司是致力于研發(fā)制造高質(zhì)量色譜耗材配附件的高科技生產(chǎn)廠家，我們?cè)跓o氣泡較高凈化能力的溶劑進(jìn)樣過濾器、超高壓在線過濾器、較少死體積色譜保護(hù)柱生與卡套、0.1μm高光潔度色譜柱柱管、鬼峰去除柱、管路接頭等領(lǐng)域具有十多年豐富的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)和較強(qiáng)大的制造技術(shù)能力。