高效液相色譜為什么會出現(xiàn)雙峰？

        明明實驗時只分析一種物質(zhì)，為什么峰圖會出現(xiàn)雙峰呢？通常情況下，正確的峰型應該是尖銳而對稱的，出現(xiàn)雙峰應該是實驗過程中有錯誤的步驟導致的。液相色譜出現(xiàn)“雙峰"的原因有很多。一般有以下幾種原因：色譜柱、溶劑、進樣量、樣品特性和pH值。恒譜生簡單介紹其中色譜柱、溶劑因素導致出現(xiàn)雙峰及解決辦法。

        色譜柱

        如何判斷是色譜柱出現(xiàn)問題導致雙峰出現(xiàn)呢？操作人員分析單一純物時，如果每個色譜峰都出現(xiàn)雙峰，可以確定是色譜柱頭受損或者是柱頭污染了。如果是色譜柱正常，進樣量少并且色譜峰形為一大峰帶一小峰，不一定拖尾，這種情況可能是柱頭受堵?？梢詫⑸V柱反過來接，用流動相或其它溶劑沖洗掉堵在柱頭的殘留物，然后再反過來，一般都能解決。如果反復還是不能解決問題，可能是柱頭塌陷的問題。恒譜生液相色譜柱壽命在正確使用時可達2年以上，但是柱子使用一段時間后，可能有一些吸附作用強的物質(zhì)保留于柱頂造成柱頭塌陷，這時可補加填料使柱效恢復。每次使用完色譜柱后，需用洗脫能力強的洗脫液沖洗，以延長色譜分析柱的壽命。

        色譜柱頭塌陷的原因有很多，比較常見的是色譜泵壓力過高，填料壓碎產(chǎn)生空隙。除此之外還有諸如裝填時壓力過低，不密實；流動相溶解填料，造成空隙；色譜柱入口篩板堵塞等原因。恒譜生色譜篩板能有效地攔截樣品、流動相或管線及密封件的顆粒物對色譜柱的污染，保護色譜柱和儀器。篩板使用一段時間后，攔截的污染物會堵塞篩板，因此需要定期更換。但是相較于損壞色譜柱，更換一個篩板顯得性價比更高，成本更低廉。

        溶劑問題

        反相色譜流動相多為甲醇、乙腈、水，實驗中往往會從中加各種添加劑以改善分離性能。有時候為了樣品的溶解性或穩(wěn)定性加入了一點的緩沖液，但是緩沖液的酸堿性可能會導致樣品轉(zhuǎn)化，從而產(chǎn)生雙峰現(xiàn)象?？梢愿鼡Q緩沖液或者更換流動相試一試。

        影響雙峰出現(xiàn)的原因還有很多，比如樣品超過柱載量，從而導致二次分配；儀器間隔記錄時間太短都有可能造成雙峰出現(xiàn)。因此具體情況要具體分析，以上僅供各位色譜工作者參考。想知道更多色譜相關(guān)咨詢，可關(guān)注恒譜生！