HPLC溶劑選擇中的關(guān)鍵考慮因素

選擇用作HPLC分析流動(dòng)相的溶劑是色譜分析過(guò)程的關(guān)鍵步驟。到現(xiàn)在為止，沒(méi)有一種能夠滿足所有分析需求的通用溶劑，而且根據(jù)分析要求所使用的溶劑組合會(huì)變得更多。選擇合適的溶劑是根據(jù)其物理性質(zhì)以及與樣品、色譜柱固定相的相容性。

流動(dòng)相溶劑選擇的一般要求是：溶劑應(yīng)當(dāng)是高純度，溶劑與固定相不互溶，并能保持色譜柱的穩(wěn)定性，建議使用純水或者液相色譜專用的溶劑；溶劑的性能與使用的檢測(cè)器應(yīng)當(dāng)匹配；溶劑對(duì)樣品應(yīng)有足夠的溶解能力，樣品要*溶于流動(dòng)相。如果有不溶的樣品將導(dǎo)致流動(dòng)相分離或懸浮，會(huì)導(dǎo)致后續(xù)一系列的操作問(wèn)題；溶劑應(yīng)具有低的粘度和適當(dāng)?shù)偷姆悬c(diǎn)；盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑。

除此之外本文還討論了選擇合適的流動(dòng)相溶劑的一些其他重要的考慮因素。

成本

成本是一個(gè)重要的考慮因素，因?yàn)?span style="font-size: 19px;">HPLC需要高純度等級(jí)的溶劑，特別在大型實(shí)驗(yàn)室中經(jīng)?？吹綌?shù)十個(gè)HPLC系統(tǒng)全天候運(yùn)行。這意味著每天會(huì)大量消耗高純度的溶劑，因此成本方面的考慮至關(guān)重要。想要既符合實(shí)驗(yàn)要求又價(jià)格比較實(shí)惠的溶劑，很多時(shí)候都不能同時(shí)滿足。如果這個(gè)時(shí)候溶劑還沒(méi)有充分使用，造成浪費(fèi)，就更得不償失了。

恒譜生2μ,5μ,10μ,20μm入口溶劑過(guò)濾器吸濾頭，不會(huì)將空氣引入系統(tǒng)，無(wú)氣泡進(jìn)入流動(dòng)相管路，儲(chǔ)液瓶溶劑抽取利用率可達(dá)99%以上，大大減少瓶底溶劑因無(wú)法凈真空吸取而造成的浪費(fèi)。

吸光度

通常，HPLC中使用的檢測(cè)器基于樣品成分對(duì)光的吸收。在選定的波長(zhǎng)范圍內(nèi)，流動(dòng)相成分的固有吸光度不能干擾樣品的吸光度。理想情況下，流動(dòng)相溶劑在目標(biāo)波長(zhǎng)范圍下沒(méi)有吸收光線是好的。

揮發(fā)性

流動(dòng)相溶劑應(yīng)具有低揮發(fā)性。高揮發(fā)性溶劑可能導(dǎo)致流動(dòng)相組成在使用和存儲(chǔ)過(guò)程中發(fā)生變化，這會(huì)導(dǎo)致色譜圖的重現(xiàn)性很差。

    黏度

所選的溶劑應(yīng)具有低粘度讓流過(guò)色譜柱的流體不會(huì)產(chǎn)生高背壓。色譜柱背壓形成的原因有很多，樣品的易吸附機(jī)制也可能會(huì)和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生作用導(dǎo)致色譜柱背壓升高。如果有顆粒物堵塞柱頭也會(huì)導(dǎo)致色譜柱背壓升高。為了防止色譜柱背壓升高，我們可以選擇在液相系統(tǒng)中加入在線過(guò)濾器，在線溶劑過(guò)濾器安裝在液相泵和進(jìn)樣器之間，能夠去除溶劑中的顆粒物，避免它們進(jìn)入進(jìn)樣器，從而防止堵塞。HPLC技術(shù)對(duì)到達(dá)檢測(cè)器的流動(dòng)相的組成非常敏感，因此必須通過(guò)在線過(guò)濾器除去溶劑里的固體懸浮液。脫氣也是去除任何少量溶解空氣的必要條件，否則會(huì)導(dǎo)致流量限制或雜散峰。

恒譜生不銹鋼在線過(guò)濾器安裝在泵的出口和進(jìn)樣閥之間，采用濾杯式結(jié)構(gòu)受液面積大，使用壽命長(zhǎng)，既可有效的防止顆粒進(jìn)入系統(tǒng)，又能保證足夠的液流。恒譜生液相超高壓在線過(guò)濾器色譜耗材配件抗腐蝕性好；清洗或更換簡(jiǎn)便；不易堵塞，壽命產(chǎn)品；死體積少，不漏液，低背壓，有多種規(guī)格可供選擇。

惰性

所選溶劑應(yīng)對(duì)樣品組分，色譜柱填充物和色譜柱材料呈惰性。如果與這些成分中任何一種有反應(yīng)性都可能導(dǎo)致形成沉淀物，氣體或其他反應(yīng)產(chǎn)物，從而破壞系統(tǒng)性能。溶劑與樣品接觸后不應(yīng)形成單獨(dú)的相。換句話說(shuō)，應(yīng)該與溶劑*混溶。

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