HPLC、UHPLC 樣品制備時該注意些什么？

        樣品過濾是制備色譜分析樣品的關鍵步驟。實驗前如果不過濾樣品會導致色譜柱篩板堵塞等問題，從而導致背壓增高和色譜柱性能下降。最終，這會增加花在色譜儀故障排除和維護上的時間，浪費時間也增加科研人員的工作量。

        對于大多數(shù)類型的樣品，過濾處理相對比較簡單。在進樣前用溶劑進樣口過濾器對流動相過濾。這一步也非常重要，用色譜過濾頭可有效濾除流動相中的固體顆粒雜質；未經(jīng)過濾的溶劑或溶劑瓶中生長的微生物都會降低液相色譜柱和泵的性能。使用一段時間后需要定期清洗或更換溶劑入口濾頭。

        在食品和飲料行業(yè)分析時，一些濃糖漿、果肉汁和脂肪等具有粘性或含有大量顆粒物樣品是比較難過濾的。并且如果你的樣品含有玉米淀粉、糖漿、大豆、蔗糖或水果添加劑等成分，使用標準注射器過濾器也是一項挑戰(zhàn)。

        過濾具有粘性樣品時需要注意什么問題？手推動粘性樣品通過注射器過濾器時，需要用手大力推，需要使用多個注射器，降低效率；由于玻璃料堵塞可能需要增加泵壓力；分析容易出現(xiàn)肩峰或分裂色譜峰等等。

        如何更有效地過濾粘性樣品？

        可以用帶有預過濾疊層的針頭式過濾器，疊層由超細纖維組成，可在較大顆粒到達孔徑的過濾器之前將其攔截捕獲。這能較高效率處理冗長的樣品量。

        選擇具有正確化學相容性的過濾器也很重要。例如，對水性樣品使用疏水性材料會導致背壓積聚。選擇錯誤的膜會導致其他性能問題。

         恒譜生總結了以下幾個HPLC、UHPLC 樣品制備注意事項，供大家參考：

        對注射器最好施加均勻適度的壓力，以確保產(chǎn)生一致的樣品。如果背壓開始產(chǎn)生明顯阻力，請檢查您的過濾器是否有問題。

        如果您遇到過濾背壓增高、膜堵塞或由于未過濾的顆粒進入進樣器而導致色譜柱性能下降，請考慮使用預過濾疊層。色譜柱性能下降是需要重點關注的問題，平常維護也需要用心。在柱前添加一個保護柱相當于在色譜柱前增加了一段額外的填料，起到了保護整個色譜柱的作用。如果在意增加色譜保護柱可能會引起死體積增大，可以采用恒譜生直聯(lián)式保護柱套，它可與色譜柱入口直接相連，手緊直聯(lián)不需要其他的連接管路，也可達到優(yōu)異的色譜性能，不會增加死體積。

        如果使用注射器時有強烈的阻力，請勿強行讓樣品通過。這樣做可能會導致不必要的問題，甚至可能導致過濾器泄漏。

        當您有大量樣品時，不要自動選擇窄直徑過濾器。請選擇適合體積的直徑。

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