液相色譜法純化分離花青素

一、什么是花青素:

   花青素是一種黃酮類(lèi)化合物。游離花青素在自然條件下很少見(jiàn)，常與葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等一種或多種糖苷鍵形成花青素。

二、花青素的好處：

   花青素的作用是使植物能夠顯示顏色?；ㄇ嗨匾彩且活?lèi)具有健康益處的活性成分：通過(guò)清理體內(nèi)的自由基，降低氧化酶的活性。研究已發(fā)現(xiàn)可降低高脂血癥大鼠的甘油脂水平并改善高甘油脂脂蛋白的分解代謝。

三、花青素的分離、純化和鑒定：

   花青素粗提物中含有大量的碳水化合物、有機(jī)酸、氨基酸和蛋白質(zhì)等，不僅含量低、色值低，而且易吸潮。在實(shí)際應(yīng)用中會(huì)產(chǎn)生大量的沉淀，極大地阻礙了活性研究和結(jié)構(gòu)鑒定的需要。因此，有必要建立一種具有成本效益的凈化方法來(lái)清除雜質(zhì)。

   柱層析：根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中的分配系數(shù)不同而發(fā)生分離過(guò)程。色譜柱根據(jù)填充基質(zhì)和樣品分布與交換原理的不同，可分為大孔樹(shù)脂柱、硅膠柱、聚酰胺柱、凝膠柱和離子交換柱。

   液相色譜：分離產(chǎn)物純度高、回收率高、分離效率高，樣品處理量大。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于花青素的分離、富集和純化。由于花青素在酸性條件下穩(wěn)定，應(yīng)選用耐酸性強(qiáng)的色譜材料。

四、液相色譜法：

   使用恒譜生USHA-c18色譜柱4.6*150mm，5um。C18 色譜柱基于表面覆蓋率高的 C18 改性硅膠顆粒，具有封端功能，可將不需要的硅烷醇活性降低。色譜柱用于分離疏水性從低到高的分析物。

    C18、C8 和 C4 都是直鏈烷基硅烷相。C18 是辛基癸基硅烷，含有 18 個(gè)與二氧化硅結(jié)合的碳。因此它們比 C8（8 個(gè)碳）或 C4（4 個(gè)碳）具有更多的碳和更長(zhǎng)的碳鏈。由于額外的碳，C18 具有更大的表面積，流動(dòng)相必須穿過(guò)。這在鍵合相和洗脫物之間提供了更多的相互作用時(shí)間。因此，樣品洗脫得更慢，分離度更高。

   相比之下，C8（也稱為辛基）的保留時(shí)間更短，峰更尖銳。這些色譜柱類(lèi)型更適合小型有機(jī)化合物，而 C18 更適合長(zhǎng)鏈脂肪酸和復(fù)雜分子。

   液相色譜和質(zhì)譜（LC-MS）是用寬選擇性液相色譜分離組分，然后用高靈敏度質(zhì)量檢測(cè)器分析結(jié)構(gòu)和組成。