先用正己烷-乙腈(99：1)以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積，再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、異丙醇、甲醇、甲醇-水(50：50)沖柱子。以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的氫氧化鈉(LUNA)水溶液沖柱子(注意pH值切不可超過11.0)，立即用水(0.5ml/min的流速，30倍柱體積)沖洗，再換成流動相。配制流動相時，應各組分分別量取，比例較小的組分要精密量取，需調pH值時要精密到0.1。反相條件下使用時，要特別注意控制pH值范圍，pH值越...

無論正在利用何種相互作用，液相柱色譜法都分六個步驟進行：柱平衡樣品裝載洗滌洗脫清洗色譜柱再生一、柱平衡：大多數(shù)液相色譜方案從樹脂平衡步驟開始。與目標蛋白質和所選樹脂相容的緩沖液通過柱子。一種常見的做法是用5-10柱體積(CV)的平衡緩沖液平衡柱。例如，蛋白質與疏水相互作用樹脂的結合在高離子強度下有效。在選擇平衡緩沖液時也要考慮目標蛋白質的特性，因為離子強度等緩沖液因素會受到蛋白質穩(wěn)定性的限制；通常，人們會避免使用會使感興趣的蛋白質變性或阻止其與固定相相互作用的平衡緩沖條件。二...

許多用戶對溶劑梯度洗脫分離后LC色譜柱應該重新平衡多長時間有疑問。在這里，我們展示了對于反相和HILIC分離而言，再平衡周期短的令人滿意的結果。LC用戶通常會提出和討論關于在溶劑梯度洗脫分離后重新平衡LC色譜柱多長時間的問題。在本文中，我們根據(jù)最近對該主題的研究討論了細節(jié)，并表明即使對于HILIC分離，在兩個柱體積數(shù)量級的短再平衡周期內也可以獲得令人滿意的結果。一、核心概念在溶劑梯度洗脫模式下使用LC時，必須有一段時間，通常是在分析結束時，在溶劑梯度的第一部分中使用的流動相流...

高效液相色譜法是提取和純化甜味劑的可靠技術。在食品工業(yè)中被廣泛應用；食品糖的甜味與蔗糖相似，熱量只有三分之二。這種五碳糖存在于許多植物中，但大多濃度較低（約1%），因此提取和純化成本很高。因此，迄今為止，食品糖主要通過化學方法生產(chǎn)，使用催化木糖脫氫。一、在木糖轉化中引入HPLC一種有吸引力的替代方法是通過發(fā)酵將生物質（例如麥秸）中的木糖轉化為食品糖。通過該工藝，甜味劑可以在溫和條件（大氣壓和環(huán)境溫度）下以高產(chǎn)率生產(chǎn)，不含有害化學物質。一旦微生物合成了所需的糖醇，就可以通過高效...

溫度的變化會對色譜分析方法的重現(xiàn)性和色譜柱的壽命產(chǎn)生重大影響。但為什么會這樣？恒譜生在以下的內容將會為您介紹。一、再現(xiàn)性隨著溫度的變化，液相色譜柱內固定相和流動相之間的熱力學會受到直接影響。在不同溫度下運行方法可能會影響分析物容量因子(k)或分析物在色譜柱上的保留時間。在升高的溫度下，流動相和分析物的動能都會增加。分析物動能的增加將導致它們更強烈地移動和振動，并將破壞分子間結合，即分析物和固定相之間的分離和保留機制。很多時候，這會導致所有分析物更快地從液相色譜柱中流出，從而縮...

緩沖液是一種含有弱酸及其共軛堿（或弱堿及其共軛酸）的水溶液。加入少量強酸或強堿后，緩沖溶液的pH值變化很小，當小的環(huán)境因素發(fā)生變化時，有助于抵消分析方法中的條件變化。緩沖溶液用于將pH值保持在幾乎恒定的值。由于這種弱酸(HA)與其共軛堿之間存在平衡，它們對pH變化具有抵抗力。一、hplc緩沖液的工作原理當一些強酸（更多的H+）被添加到弱酸及其共軛堿的平衡混合物中時，根據(jù)LeChatelier原理，平衡向左移動。類似地，如果將強堿添加到混合物中，則氫離子濃度降低的量小于所添加堿...